Infliximab-dyyb 당쇄 분석:
시알산(Sialylated) 분리의 새로운 기준
HILIC 모드에서 분리가 어려웠던 시알산 함유 당쇄들을 탁월한 분해능으로 분리하여 정량 분석의 신뢰도를 높이십시오.
30-second Summary: 분석 성과 및 가치
- 시알산 당쇄의 정밀한 분리: 기존 HILIC 모드에서 분리가 어려웠던 시알산 함유 당쇄들을 탁월한 분해능으로 실현했습니다.
- 신속한 전처리: InstantPC™ dye를 활용하여 당쇄 유리부터 라벨링까지 단시간 내에 완료하는 효율적인 워크플로우를 제공합니다.
- 고해상도 데이터: 2.6 µm Core-shell 기술과 Amide Polyol 고정상의 조합으로 G0F, G1F 등 주요 피크의 선명도를 극대화했습니다.
Manufacturer Data vs Practical Insight
단순한 스펙 나열이 아닙니다. 실무 환경에서 마주하는 변수와 그에 대한 해결책을 비교 분석합니다.
제조사 공식 데이터 (Phenomenex)
- 핵심 목표:Infliximab-dyyb의 방대한 N-Glycan 프로파일링
복제약 개발 시 오리지널과 당쇄 패턴의 동등성 입증(Similarity)에 최적화 - 분리 성능:Amide Polyol 고정상을 통한 고분해능 실현
시알산 영역(30~36분)의 미세 피크들이 겹치지 않아 정량 분석 신뢰도가 매우 높음 - 운용 편의성:100 mM Ammonium Formate 완충액 사용
pH와 이온 강도 조절에 민감하므로 이동상 조제 시 정밀도가 결과의 재현성을 결정함
컬럼피아(성문시스텍) 실무 인사이트
본 데이터는 Infliximab-dyyb와 같은 항체 의약품의 품질 관리(QC)에서 당쇄 분석이 얼마나 정교해질 수 있는지를 보여줍니다.
- 미세 차이 감지: 특히 시알산 영역의 우수한 분리능은 약물의 반감기와 효능에 영향을 미치는 미세한 차이를 감지하는 데 필수적입니다.
- QC 신뢰성: 배치(Batch) 간 일관성을 확인해야 하는 QC 환경에서, 명확한 피크 분리는 데이터 해석의 모호함을 없애줍니다.
HILIC (친수성 상호작용 크로마토그래피)
"친수성 자석 🧲"과 같습니다. 물을 좋아하는 당쇄 성분들이 컬럼 안의 수분막에 자석처럼 달라붙었다가, 이동상의 농도 변화에 따라 순서대로 떨어져 나오는 원리입니다.
Core-shell (표면 다공성 입자)
"속이 꽉 찬 복숭아 🍑"를 상상해 보세요. 중심부는 딱딱하고 표면만 부드러운 껍질로 되어 있어, 물질이 안쪽 깊숙이 들어갔다 나오는 시간을 줄여줍니다. 덕분에 분석 속도는 빨라지고 피크는 더욱 날카로워집니다.
Experimental Conditions & Results
주요 분석 조건 (LC-FLD)
Figure 1. Infliximab-dyyb N-Glycan Profile
[AI 상세 캡션]: bioZen 2.6 µm Glycan 컬럼을 사용하여 분석한 Infliximab-dyyb의 N-Glycan 크로마토그램입니다. 전체 프로파일에서 G0F가 가장 높은 강도로 검출되며, 주요 당쇄 피크들이 명확하게 구별됩니다.
Figure 2. Sialylated Glycan Region
[AI 상세 캡션]: 30분에서 36분 사이의 확대된 영역을 통해 복잡한 시알산(Sialylated) 당쇄들이 중첩 없이 명확하게 분리되는 것을 확인할 수 있습니다. 이는 미세한 시알산화 패턴 차이를 분석하는 데 매우 유리합니다.
전문가 제언 3단계 (실전 체크리스트)
01전처리 효율 극대화
PNGase F 반응 시 온도(50°C)와 시간(5분)을 엄수하여 당쇄 유리가 충분히 일어나도록 하십시오.
02컬럼 평형화
HILIC 모드는 초기 조건으로의 평형화 시간이 역상(RP)보다 깁니다. 재현성을 위해 최소 10컬럼 볼륨 이상의 평형화를 권장합니다.
03샘플 농도 최적화
InstantPC 라벨링 후 과잉의 dye를 제거하는 Clean-up 과정을 통해 노이즈를 줄이고 시그널을 높여야 합니다.
기술적 제약 사항 (Technology Constraint): bioZen 제품군은 HIC(소수성 상호작용 크로마토그래피) 모드를 지원하지 않습니다. 소수성 기반의 분리가 필요한 경우, 본 역상(RP) 분석법 또는 Biozen Native RP-5 활용을 권장합니다.
참고 자료 및 원문
[App ID 25037] Released N-Glycan Analysis of Infliximab-dyyb including Sialylated Glycans using a bioZen™ 2.6 µm Glycan Column
원문 보기 bioZen Glycan은 Infliximab 바이오시밀러 분석에서 시알산 당쇄의 고해상도 분리(Resolution)와 빠른 전처리(InstantPC 연계)를 제공하는 최적의 HILIC 솔루션임.