Column Care
[BioSep / Yarra GFC] Column Care Note: 공식 유지보수 가이드
BioSep 및 Yarra GFC 컬럼의 수명 연장과 최적 성능을 위한 공식 유지보수 가이드 (역세척 금지)
📢 핵심 요약 (Quick Summary)
Phenomenex BioSep 및 Yarra GFC 컬럼은 정밀하게 제조된 실리카 기반 GFC-SEC 컬럼입니다. 해당 컬럼들은 다른 컬럼들과 달리 절대 역세척(Backflush)을 해서는 안 되며, 지정된 pH 범위(2.5 - 7.5) 및 압력 제한을 엄격히 준수해야 합니다.
📊 공식 운영 사양 (Technical Specifications)
| 항목 | 상세 사양 |
|---|---|
| 적용 모델 | BioSep: SEC-S2000, SEC-S3000, SEC-S4000 Yarra 3u: SEC-2000, SEC-3000, SEC-4000 |
| 최대 압력 (Max Pressure) | BioSep: 1,500 psi (100 bar) MAX Yarra: 3,000 psi (200 bar) MAX ※ 컬럼 전후단 차압(Delta P) 기준 |
| pH 범위 | pH 2.5 - 7.5 |
| 최대 온도 | 50°C Max |
| 권장 유속 |
|
| 보호 컬럼 (Guard) | Phenomenex SecurityGuard Cartridge System 사용 권장 💡 Tip: 이동상에 0.1M~0.5M 염(Salt)을 포함하면 비특이적 흡착을 줄일 수 있습니다. |
🧼 세척 및 관리 절차 (Cleaning & Care)
평형화 및 준비
- 1시스템 플러싱: 필터링 및 탈기(Degas)된 이동상으로 펌프와 라인을 세척합니다.
- 2연결: 유속을 0.1 mL/min으로 설정하고 컬럼의 화살표 방향에 맞춰 연결합니다.
- 3유속 증가: 7.8 mm ID 기준 1 mL/min (4.6 mm ID는 0.3 mL/min)까지 5분간 천천히 올립니다.
- 4평형화: 작동 유속에서 안정적인 베이스라인이 관찰될 때까지 컨디셔닝을 수행합니다.
보관 방법
- 단기 보관 (Overnight): 이동상을 0.1~0.2 mL/min의 낮은 유속으로 계속 흘려보내는 것을 권장합니다.
- 장기 보관: 0.05% NaN₃(아지드화나트륨) 수용액 또는 10% Methanol 수용액을 채운 후, 엔드 플러그(End-plugs)를 단단히 조여 마르지 않게 하십시오.
- ※ 주의: NaN₃ 취급 시 독성에 유의하며, 컬럼이 절대 얼지 않도록 상온(4°C~상온)에서 보관하십시오.
세척 절차 (300mm x 7.8mm 컬럼 기준)
일반 세척
pH 3.0의 0.1 M Na₂HPO₄ (인산이수소나트륨) 버퍼 30 mL 사용.
소수성 단백질
물(A)/ACN(B) 구배: 0.5 mL/min으로 30분간 0%→100% B 후, 30분간 100%→0% B.
※ 주의: ACN 전 100% 물 세척 필수
강한 흡착
0.5% SDS, 6M Guanidine thiocyanate 또는 10% DMSO 30 mL 세척 후 즉시 물로 밤샘 세척.
⚠️ 공식 주의사항 (Important Notes)
- 역세척 절대 금지: Yarra 및 BioSep GFC 컬럼은 다른 브랜드와 달리 역세척(Backflush)이 불가능하며, 시도 시 컬럼이 영구적으로 손상됩니다.
- 유기용매 사용 시 압력 주의: 세척 시 ACN 등 유기용매가 수용액과 혼합되면 점도가 높아져 압력이 급증할 수 있습니다. 반드시 유속을 0.5 mL/min 이하로 낮춰 모니터링하십시오.
- pH 제한: pH 2.5 미만에서는 작용기 이탈, pH 7.5 초과 시 실리카 용해 위험이 있습니다.
- 시료 준비: 모든 시료는 주입 전 0.45μm 또는 0.2μm 필터로 여과해야 하며, 이동상에 완전히 용해되어야 합니다.
- 기계적 충격 방지: 컬럼 낙하 충격 및 급격한 유속 변화를 피하십시오. 서서히 유속을 올려야 합니다.
- 용매 교체 주의: 버퍼/염 용액 교체 시 서로 섞임성(Miscibility)을 확인하여 침전을 방지하십시오.