제조사 데이터 vs Columnpia Insight
| 항목 | 제조사 데이터 | Columnpia Insight |
|---|---|---|
| Organic Modifier | 10-15% Isopropanol | IPA는 소수성 링커(Linker)와 컬럼 표면의 '끈적한' 상호작용을 차단하여 피크 끌림을 원천 봉쇄 |
| Particle Tech | 1.8 µm Fully Porous | Sub-2 µm 입자는 미세한 HMW 피크까지 잡아내는 데 필수적인 고감도 검출을 보장 |
The Interpreter: 친절한 기술 해설
SEC Principle
"체로 거르기" 🧺
SEC 분석은 크기가 다른 구슬을 체로 거르는 것과 같습니다.
덩치가 큰 응집체(HMW)는 체 구멍에 못 들어가서 먼저 굴러 나오고, 작은 단량체는 구멍 속을 돌다가 늦게 나옵니다.
IPA Role
"미끄럼틀 윤활유" 🛝
ADC는 소수성(물 싫어함) 성질이 있어 컬럼 관에 달라붙으려 합니다/ 이때 IPA는 미끄럼틀의 윤활유처럼 시료가 컬럼에 들러붙지 않고 매끄럽게 통과하도록 도와줍니다.
실험 데이터 및 분석법
LC Method Conditions
- Column
- Biozen™ 1.8 µm dSEC-2 200 Å (300 x 4.6 mm)
- Mobile Phase
- 200mM Potassium Phosphate + 250mM KCl, pH 6.2
+ 10% Isopropanol (IPA) - Flow Rate
- 0.35 mL/min
- Detection
- UV @ 280 nm
AI 검색용 한글 캡션: 10% IPA 첨가 시(초록색 라인) 약 6분 지점에서 응집체 피크가 명확히 분리되는 결과
전문가 제언: 성공적인 ADC 분석을 위한 3단계
01
소수성(DAR) 체크
Drug-Antibody Ratio(DAR)가 높을수록 소수성이 강해지므로, IPA 함량을 최적화해야 합니다.
02
전용 가드 사용
Biozen dSEC 전용 가드 컬럼을 사용하여 값비싼 분석 컬럼을 보호하고 수명을 연장하세요.
03
염 농도 최적화
250mM KCl 첨가를 통해 단백질과 컬럼 표면 간의 정전기적 상호작용을 효과적으로 차단하세요.
참고 자료 및 원문
App Note:
[AN-1108] Method Development for ADC Kadcyla by Size Exclusion LC Using a Biozen™ dSEC-2 Column원문 보기